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人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit實驗原理
點擊次數:1331 更新時間:2010-10-06

人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit實驗原理


英文名稱:Human eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA
1. 采用雙抗體夾心法測定標本中人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit水平。
2. 首先用純化的人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit,再與HRP標記的嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成    藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit呈正相關。
5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit濃度
。
目的:測定人的血清,血漿及相關液體樣本中嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA kit的含量。

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。
7. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4   Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標準規格酶標儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
 
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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